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上海酶聯(lián)細(xì)胞培養(yǎng)基簡述
更新時間:2025-03-13   點擊次數(shù):167次

培養(yǎng)的細(xì)胞需要細(xì)致的環(huán)境控制才能成功生長和維持。全面的方法包括確保無菌、營養(yǎng)供應(yīng)、pH穩(wěn)定性和溫度控制。

無菌條件和營養(yǎng)供應(yīng)為了防止污染并確保細(xì)胞存活,無菌環(huán)境至關(guān)重要。這通常是通過無菌技術(shù)和專門設(shè)備如層流罩來實現(xiàn)的。營養(yǎng)是通過培養(yǎng)基提供的,培養(yǎng)基中含有多種必需成分,

氨基酸:

蛋白質(zhì)的組成部分;有些是必需的,不能由細(xì)胞合成。

媒體變體和優(yōu)化

多年來,已經(jīng)開發(fā)了各種基礎(chǔ)培養(yǎng)基來滿足特定細(xì)胞類型的需要:

基礎(chǔ)培養(yǎng)基,

*低必需培養(yǎng)基(MEM),用于原代培養(yǎng)和二倍體細(xì)胞。

復(fù)雜介質(zhì):

RPMI1640一樣,它們適用于更廣泛的哺乳動物細(xì)胞。

維生素:

作為酶促反應(yīng)的輔助因子;b族維生素對細(xì)胞新陳代謝至關(guān)重要。

脂肪酸和脂類:

細(xì)胞膜完整性和功能的基本成分。

蛋白質(zhì)和肽:

在無血清培養(yǎng)基中,這些取代了通常由血清提供的生長因子和結(jié)合蛋白。

血清:

雖然無血清替代品越來越受歡迎,以減少可變性和污染風(fēng)險,但通常作為生長因子的來源。

pH和溫度穩(wěn)定性:

細(xì)胞通常需要7.2-7.4的pH范圍以實現(xiàn)最佳生長。這是由緩沖系統(tǒng)調(diào)節(jié)的,緩沖系統(tǒng)可以是基于CO2/碳酸氫鹽的,也可以是使用諸如HEPES之類的試劑通過化學(xué)方法實現(xiàn)的。溫

度保持在37°C左右,以模擬生理條件。

無血清培養(yǎng)基:

為特定應(yīng)用量身定制,降低動物源性成分的污染風(fēng)險。

媒體準(zhǔn)備和質(zhì)量控制

培養(yǎng)基可以由基本成分在內(nèi)部制備,也可以購買現(xiàn)成的溶液。質(zhì)量控制包括確保沒有污染物和成分的適當(dāng)濃度。粉末培養(yǎng)基的復(fù)原需要高等級的水,并且制備的培養(yǎng)基必須滅菌,

通常通過過濾。

血清使用和安全注意事項

血清,尤其是胎牛血清(FBS)的使用是常見的,因為其含有豐富的生長因子,然而,由于對瘋牛病等疾病的關(guān)注,嚴(yán)格的測試和采購協(xié)議是為了確保安全。

法規(guī)指導(dǎo)動物源材料的培養(yǎng),強(qiáng)調(diào)采購和測試的重要性,在可能的情況下消除這些材料的趨勢反映在開發(fā)無血清和無動物的培養(yǎng)基替代品中。

總之細(xì)胞培養(yǎng)基在體外細(xì)胞的生長和維持中起著重要作用,每種成分都經(jīng)過精心選擇和優(yōu)化,以模擬體內(nèi)環(huán)境,確保細(xì)胞具有生長、存活和功能性條件。

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