問題一、在加液的時(shí)候,如果不用多道移液器,對(duì)結(jié)果有影響嗎?
技術(shù)分析:對(duì)于熟練的技術(shù)人員來說,可能影響不會(huì)很大,如果不是很熟練,結(jié)果就很難說了。也正是因?yàn)槿绱耍M(jìn)口的試劑盒的說明書都要求用多道移液器或自動(dòng)加樣器加樣。
問題二、抗原的純度達(dá)到多少?
技術(shù)分析:如果對(duì)本底要求不是很高對(duì)化,不純對(duì)抗原對(duì)包被影響不大,如果可以避免交叉反應(yīng)的化,包被物中的一些雜質(zhì)有時(shí)還可以起一定的封閉作用(但僅限于),你就先用抗原包被(采用不同稀釋度),用間接法檢測(cè)。
問題三、一般做組織的ELISA,做什么液體研磨組織較好?
技術(shù)分析:如果是檢測(cè)組織內(nèi)的成分,建議采用pH在7左右離子強(qiáng)度不高的緩沖液研磨就可以,這樣對(duì)結(jié)果不會(huì)產(chǎn)生太大影響。
如果是采用研磨組織后包被,這要看你提取得成分在何種條件下能保持生物活性,建議用其保持生物活性的液體研磨,然后用pH9.6的碳酸鹽緩沖液透析,如果可以對(duì)話,可直接用pH9.6的碳酸鹽緩沖液。
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